熒光強度計基于光致發光現象:當熒光物質受到激發光(如氙弧燈、溴鎢燈等)照射時,吸收能量躍遷至激發態,隨后返回基態時發射出波長更長的特征熒光。儀器通過測量熒光的強度,結合標準曲線法或直接比較法,實現物質濃度或特性的定量分析。
熒光強度計的操作注意事項:
標準曲線法:
配制一系列標準溶液,測定其熒光強度,繪制以熒光強度為縱坐標、濃度為橫坐標的標準曲線。
后續樣品分析需在相同條件下進行。
溫度控制:
熒光強度受溫度影響顯著,測試時溫度變化應控制在±3℃以內。
高級熒光計配備液槽冷卻裝置,以維持溫度恒定。
pH值調節:
對于弱酸或弱堿類熒光物質,溶液pH值會影響分子電離平衡,進而改變熒光強度。
需通過條件試驗確定最適pH范圍。
熒光猝滅劑:
鹵素離子、重金屬離子、溶解氧等可能引起熒光熄滅,需在實驗中除氧或避免使用猝滅劑。